PRÁCTICA 2 Ejercicio de pipeteo

RESULTADO DE APRENDIZAJE PROPUESTO.
 Ejecuta las técnicas de pipeteo en el laboratorio clínico de acuerdo a la normatividad vigente.



INTRODUCCIÓN

Las Pipetas son tubos de cristal o plástico abiertos por ambos lados, que se usan para

transferir cantidades precisas de líquido de un recipiente a otro. Se usan normalmente para volúmenes entre 1 y 100 mililitros

PIPETAS VOLUMÉTRICAS

• Se usan para medidas exactas, ya que están diseñadas para dispensar sólo un volumen y están calibradas para ese volumen.

• Tienen una ampolla central que determina el volumen de la pipeta. Normalmente entre 1 y 100 ml.

• Se deben utilizar cuando la exactitud y reproducibilidad sean cruciales,

ESPECIFICACIONES DE UNA PIPETA VOLUMÉTRICALas especificaciones impresas en una pipeta volumétrica
indican:• cuánto líquido transfiere la pipeta si se enrasa a la línea de calibración del cuello
• la temperatura a la que se ha calibrado
• Si es una pipeta TD (to deliver) o TC (to contain)

• Cuando se vacíe una pipeta volumétrica, se deja salir el líquido. Pero NUNCA se fuerza soplando.

• Despues de vaciada, no se debe forzar (soplando) la salida de la pequeña cantidad de líquido que permanece en la punta.

• Las pipetas volumétricas no son pipetas de vaciado por soplado (blow-out)

PIPETAS GRADUADAS

• Tubo recto de cristal o plástico con estrechamiento en uno de sus extremos. Están calibradas en pequeñas divisiones de manera que se pueden medir diferentes cantidades de líquido con la misma pipeta.

• Normalmente se usan para medir cualquier cantidad entre 0.1ml y 25.0ml.

• No son tan exactas como las volumétricas debido a que las imperfecciones de su diámetro interno tienen mayor efecto en el volumen dispensado.

PIPETAS MOHR Y SEROLÓGICAS

Las pipetas graduadas se dividen en:

• PIPETAS MOHR

– La graduación en ellas siempre termina antes de la punta

• SEROLOGICAL PIPETTES

– La graduación en ellas llega hasta la punta

ESPECIFICACIONES EN UNA PIPETA GRADUADA

Impresas en el cuello de la pipeta están las especificaciones, que indican:• el volumen máximo de líquido que se puede transferir

• el tamaño de las divisiones de la pipeta

• la temperatura de calibración• si es una pipeta TD (to deliver) o TC (to contain) 5 in 1/10 ml TD 20oC Las especificaciones de una pipeta como las que se muestran arriba indican que la pipeta está calibrada en divisiones 1/10ml y que dispensará hasta 5ml con los márgenes de error publicados a 20ºC. 1 ml in1/100 TD 20oC Estas especificaciones indican que la pipeta está

calibrada en divisiones 1/100 ml y que dispensará hasta 1,00 ml con los márgenes de error publicados a 20ºC.

PIPETAS DE SOPLADO (BLOW OUT)

Si una pipeta serológica tiene una banda esmerilada o dos anillos alrededor del cuello, entonces es una pipeta de soplado (blow out). Esto significa que después de dejar salir el líquido por gravedad, la última gota que queda en la punta debe ser forzada a salir.La banda esmerilada no se debe confundir con bandas mas gruesas de color o con puntos coloreados, que son un código del fabricante para indicar el máximo volumen de la pipeta. Sólo se debe soplar una pipeta serológica si tiene una banda esmerilada o dos anillos estrechos.

MANEJO Y TRATAMIENTO DE LAS PIPETAS

• Las pipetas astilladas y rotas se deben reemplazar ya que son peligrosas y pueden

afectar a la precision de las medidas.

• NUNCA se debe pipetear con la boca.

• La pipeta se debe sostener por el tercio superior y evitar tocar nada con la punta.

Las pipetas sucias se deben desechar colocándolas en una solucion de agua jabonosa. Las pipetas para tirar se deben colocar en un recipiente de cartón. No se deben dejar las pipetas en poyatas o fregaderos. Si se trabaja con materiales radiactivos debe asegurarse

desechar las pipetas en contenedores debidamente marcados.

MANEJANDO PIPETAS ESTÉRILES

Cuando se usen pipetas estériles, hay que tener en cuenta las técnicas de esterilidad apropiadas. Si se usa un paquete de pipetas desechables estériles, abrir solo una esquina del paquete, empujar una pipeta a traves de esta abertura y cerrar inmediantamente para evitar contaminacion. Si se usan pipetas estériles en una canasta de pipetas, colocar la canasta de lado, retirar la tapa, sacar una pipeta y colocar la tapa inmediatamente.

TRANSFERIR UN VOLUMEN PRECISO DE LÍQUIDO

Para evitar pipetear con la boca se usa una propipeta, o pipeteador, para subir el liquido a la pipeta y así evitar hacerlo con la boca. Hay muchos tipos de propipetas manuales y automáticas. Cuando la parte inferior del menisco esté en el nivel deseado, colocamos la punta de la pipeta en el contenedor donde queramos dispensar el líquido, tocando la superficie interior del mismo para que no quede liquido retenido en la pipeta (salvo la gota típica de las pipetas normales (no soplado). Con la pipeta de la imagen habremos dispensado 0.645 + 0.001)ml.